La Galleria degli Uffizi fu costruita originariamente non come museo, ma come ufficio per i magistrati fiorentini - da qui il suo nome, "Uffizi", che in italiano significa "uffici". Commissionato da Cosimo I de' Medici, il primo Granduca di Toscana, l'edificio aveva come scopo principale quello di riunire gli uffici amministrativi toscani sotto un unico tetto, come parte degli sforzi di Cosimo per organizzare e rafforzare la sua amministrazione granducale appena istituita.
Oltre a questo, gli Uffizi erano destinati a ospitare le collezioni d'arte della famiglia Medici, una delle famiglie più ricche e influenti dell'Europa dell'epoca. Man mano che la loro collezione cresceva, alcune parti della Galleria degli Uffizi vennero gradualmente utilizzate per esporre queste opere a un pubblico selezionato, segnando l'inizio della sua transizione a galleria. Dopo la fine della dinastia dei Medici nel XVIII secolo, l'ultima erede dei Medici, Anna Maria Luisa de' Medici, lasciò in eredità l'intera collezione alla città di Firenze a condizione che non lasciasse mai la città. Questa collezione costituì il nucleo della Galleria degli Uffizi come la conosciamo oggi, aperta ufficialmente al pubblico come museo nel 1765.