A Galeria dos Uffizi foi originalmente construída não como um museu, mas como escritórios para os magistrados florentinos - daí seu nome, "Uffizi", que significa "escritórios" em italiano. Encomendado por Cosimo I de' Medici, o primeiro grão-duque da Toscana, o objetivo principal do edifício era consolidar os escritórios administrativos do estado toscano sob o mesmo teto, como parte dos esforços de Cosimo para organizar e fortalecer sua recém-criada administração grão-ducal.
Além disso, o Uffizi também foi projetado para abrigar as coleções de arte da família Medici, uma das famílias mais ricas e influentes da Europa na época. À medida que sua coleção crescia, partes dos Uffizi foram gradualmente usadas para exibir essas obras a um público seleto, marcando o início de sua transição para uma galeria. Após o fim da dinastia Medici no século XVIII, a última herdeira dos Medici, Anna Maria Luisa de' Medici, legou toda a coleção à cidade de Florença sob a condição de que ela nunca deixasse a cidade. Essa coleção formou o núcleo da Galeria dos Uffizi como a conhecemos hoje, oficialmente aberta ao público como um museu em 1765.
